普通血液科

陸道培醫(yī)院在CAR-T細(xì)胞治療血液病研究成果豐碩

陸道培醫(yī)院自2015年7月開始啟動(dòng)CAR-T細(xì)胞治療血液病臨床試驗(yàn)，并在快速發(fā)展中取得了突破性的進(jìn)展，積累了上千例血液腫瘤患者入組CAR-T細(xì)胞治療臨床試驗(yàn)，臨床數(shù)據(jù)顯示療效顯著，副作用可控。我院在CAR-T細(xì)胞治療難治/復(fù)發(fā)B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病、T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病/T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、骨髓瘤、急性髓系白血病等血液腫瘤患者方面積累了大量的臨床經(jīng)驗(yàn)。目前我院涉及的靶點(diǎn)主要有CD19，CD7，CD22, CD19+CD22雙靶點(diǎn)，CD19+CD20雙靶點(diǎn)，CD19+CD20+CD22三靶點(diǎn)，BCMA，GPRC5D, CD30, CLL1，以及CAR-NK等，下面詳細(xì)列出我院取得的幾項(xiàng)重點(diǎn)研究成果：

1.陸道培醫(yī)院在CD7CAR-T治療復(fù)發(fā)/難治急性T淋巴細(xì)胞白血病（T-ALL）和T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤的研究結(jié)果

2022年5月2日，陸道培醫(yī)院陸佩華教授團(tuán)隊(duì)在血液科國(guó)際權(quán)威期刊《Blood》（影響因子IF=25.475）發(fā)表了題為Naturally Selected CD7 CAR-T Therapy without Genetic Manipulations for T-ALL/LBL: First-in-human Phase I Clinical Trial 的研究論文。

急性T淋巴細(xì)胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia, T-ALL) 和T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤(T-cell lymphoblastic lymphoma, T-LBL)是具有高度侵襲性的T系惡性腫瘤。目前仍然缺乏針對(duì)T細(xì)胞惡性腫瘤的獲批CAR-T療法。

CD7在T-ALL/LBL T細(xì)胞表面高度表達(dá)，是潛在的CAR-T治療靶點(diǎn)。靶向CD7的免疫療法可能會(huì)受到T細(xì)胞自相殘殺機(jī)制（fratricide）的影響。因此，在既往研究中曾采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)和蛋白沉默表達(dá)技術(shù)生產(chǎn)靶向CD7的CAR-T細(xì)胞。但是，基因編輯技術(shù)會(huì)使得CD7 CAR-T細(xì)胞的生產(chǎn)成本增加。此外，使用患者自體T細(xì)胞制造CD7 CAR-T細(xì)胞仍然具有一定難度。

本研究開展探索，使用了患者或供者來(lái)源的，無(wú)需額外進(jìn)行CD7基因編輯或蛋白質(zhì)表達(dá)阻斷的“自然選擇（Naturally Selected）”CD7 CAR-T細(xì)胞(NS7CAR)的新產(chǎn)品，并在1項(xiàng)針對(duì)T-ALL/LBL患者的1期臨床試驗(yàn)中首次探索了NS7CAR療法在人體內(nèi)的安全性和有效性。

研究者使用三種不同的方法制造了靶向CD7的CAR-T細(xì)胞并比較它們的功能：1)NS7CAR：通過(guò)用7CAR轉(zhuǎn)導(dǎo)總T細(xì)胞，然后對(duì)其進(jìn)行“自然選擇”的細(xì)胞培養(yǎng)方式獲得；2)Neg7CAR：由天然存在的CD7陰性T細(xì)胞（占CD3+T細(xì)胞的3%-10%）用7CAR進(jìn)行純化和轉(zhuǎn)導(dǎo)后進(jìn)行生產(chǎn)；3)KO7CAR：通過(guò)將7CAR轉(zhuǎn)導(dǎo)到使用CRISPR/Cas9RNP敲除CD7基因的總T細(xì)胞進(jìn)行制造。

在7CAR慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)三天后，NS7CAR組中的T細(xì)胞發(fā)生了從CD7+CAR-到CD7-CAR+的快速而顯著的表型轉(zhuǎn)變。盡管NS7CAR表達(dá)CD7mRNA和蛋白質(zhì)，但它們?cè)诿庖邔W(xué)上是CD7陰性的，并由于CD7CAR的抗原隱蔽/細(xì)胞內(nèi)隔離作用而逃脫了CAR-T間的自相殘殺。

陸道培醫(yī)療團(tuán)隊(duì)在1期臨床試驗(yàn)中使用NS7CAR-T細(xì)胞，進(jìn)一步探索其有效性和安全性。此次臨床試驗(yàn)，共入組和回輸20名復(fù)發(fā)或難治性(R/R) T-ALL/T-LBL患者，其中包含14名R/R T-ALL患者及6名R/R T-LBL患者。3名患者為Ph陽(yáng)性或ETP-ALL高危亞型；11名患者存在高危突變或基因融合。5名患者在入組前接受過(guò)移植。患者接受了中位數(shù)為4.5線(2-8線)的治療。入組時(shí)，17名患者的骨髓腫瘤細(xì)胞比例中位數(shù)為21.49% (最高達(dá)87%)；有5位T-LBL和4位T-ALL患者有髓外病灶。所有患者的NS7CAR產(chǎn)品均成功制備（自體，n=18；移植供者，n=2）。在Day0，分別3、16和1名患者接受了低劑量（0.5×106/kg）、中劑量（1-1.5×106/kg）或高劑量（2×106/kg）的單次NS7CAR回輸。NS7CAR展現(xiàn)出了良好的安全性和耐受性。1名患者未出現(xiàn)CRS;18名患者的CRS≤2級(jí)，僅有一名患者出現(xiàn)3級(jí)CRS。2名患者發(fā)生1級(jí)ICANS。同時(shí)，NS7CAR在臨床試驗(yàn)中展現(xiàn)了令人振奮的好療效。在Day28時(shí)，16/17（94.12%）的骨髓受累患者實(shí)現(xiàn)了MRD陰性完全緩解；3名僅有髓外病灶的T-LBL患者也繼續(xù)保持了髓內(nèi)CRi的狀態(tài)。在9名有髓外病灶的患者中，5名在中位時(shí)間29天時(shí)達(dá)到髓外CR。兩名有巨大縱隔腫物（>7cm）的患者在第29天分別達(dá)到髓外部分緩解（PR）和疾病穩(wěn)定（SD）。至研究截止日期，患者的中位隨訪時(shí)間為142.5天，最長(zhǎng)達(dá)311天。6/20名患者在CAR-T細(xì)胞回輸后未接受額外的抗白血病治療或移植，其中4人在54天的中位時(shí)間保持無(wú)疾病進(jìn)展。10名CR患者接受了鞏固性異基因造血干細(xì)胞移植；移植后中位隨訪時(shí)間為210天，7/10名CR患者在移植后保持MRD陰性并持續(xù)生存。兩名患者因個(gè)人原因出組，出組時(shí)均處于CR。一名二次移植患者死于TRM。

 在該研究中，NS7CAR在體外和體內(nèi)均表現(xiàn)出強(qiáng)大的抗腫瘤作用。NS7CAR的首次人體臨床試驗(yàn)表明，無(wú)需額外的基因編輯即可防止CD7表達(dá)，并成功生產(chǎn)NS7CAR-T細(xì)胞。總體而言，NS7CAR對(duì)治療R/R T-ALL/LBL是安全且高效的。

在此研究的基礎(chǔ)上，我們擴(kuò)大了病例，NS7CAR-T治療60例R/R T-ALL/LBL的結(jié)果于2023年9月發(fā)表在《American Journal of Hematology》。更細(xì)分了亞組，同時(shí)呈現(xiàn)了大宗病例的長(zhǎng)期療效。

2.陸道培醫(yī)院CD7CAR-T治療難治/復(fù)發(fā)急性髓系白血病（AML）的最新成果

2024年12月，陸道培醫(yī)院陸佩華院長(zhǎng)作為第一作者和通訊作者，在國(guó)際頂級(jí)期刊《Blood》發(fā)表了題為“Nanobody-based Naturally Selected CD7-Targeted Chimeric Antigen Receptor T Cell Therapy for Acute Myeloid Leukemia”的“Regular Article”。

研究背景

難治或復(fù)發(fā)（r/r）急性髓系白血病（AML）預(yù)后相對(duì)較差，即使接受異基因造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）的患者中也是如此，迫切需要的新的療法。大約30%的AML患者在惡性腫瘤細(xì)胞上表達(dá)CD7。我們中心之前已經(jīng)發(fā)表了相關(guān)文章，證明了自然選擇的CD7 CAR-T（NS7CAR-T）療法在T細(xì)胞淋巴惡性白血病中表現(xiàn)出顯著療效，且安全性良好。

嵌合抗原受體（CAR）的傳統(tǒng)靶向域依賴于單克隆抗體（mAbs）中的IgG變量區(qū)域的單鏈片段（scFv）。最近，一種利用駱駝科重鏈抗體的單變量域，即所謂的納米抗體，作為一種替代方法，已經(jīng)變得越來(lái)越重要。納米抗體的分子大小（15kDa）大約是人IgG分子的十分之一。雖然傳統(tǒng)的mAbs需要六個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)（CDRs）來(lái)結(jié)合抗原，但納米抗體僅用三個(gè)CDRs就能維持相當(dāng)?shù)挠H和力和特異性。此外，由于它們與人類VH基因家族III的相似性，納米抗體比小鼠mAbs表現(xiàn)出更低的免疫原性。我們這項(xiàng)研究采用了納米抗體技術(shù)來(lái)生產(chǎn)NS7CAR-T細(xì)胞。在此文章中，我們報(bào)告了Nanobody-based NS7CAR-T產(chǎn)品的臨床前研究數(shù)據(jù)，以及在一項(xiàng)I期臨床試驗(yàn)中(https://clinicaltrials.gov NCT04938115) Nanobody-based NS7CAR-T治療難治/復(fù)發(fā)CD7陽(yáng)性急性髓系白血病（AML）中的安全性和有效性結(jié)果。

研究方法

基于納米抗體的dVHH NS7CAR包含兩個(gè)抗CD7納米抗體（VHHs）的編碼區(qū)域，這些區(qū)域通過(guò)一個(gè)連接子（G4S）5連接在一起，以及CD8α鉸鏈區(qū)域、CD8α跨膜域，還有一個(gè)第二代CAR細(xì)胞骨架，其在細(xì)胞內(nèi)共刺激域包含4-1BB和CD3ζ。制備時(shí)，通過(guò)白細(xì)胞采集術(shù)獲得外周血 (PB) 單核細(xì)胞，分離T細(xì)胞并用慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)。第二代CD7CAR由抗CD7單鏈抗體、IgG4鉸鏈區(qū)、CD28TM跨膜結(jié)構(gòu)域、4-1BB和CD3ζ的胞內(nèi)共刺激結(jié)構(gòu)域及截短EGFR蛋白通過(guò)T2A連接構(gòu)成。所有患者在 CD7CAR-T 回輸3天前靜注氟達(dá)拉濱 (30 mg/m2/d) 和環(huán)磷酰胺 (300 mg/m2/d)。從采集到CAR-T細(xì)胞輸注的中位時(shí)間為15天。

研究結(jié)果

在此I期臨床試驗(yàn)中，共入組了12例CD7陽(yáng)性r/r AML（CD7表達(dá)率>50%，強(qiáng)度良好），最后10例患者接受了dVHH NS7CAR-T細(xì)胞輸注，其中4例接受低劑量（5×105/kg），6例接受中等劑量（1×106/kg）。中位年齡為34歲（7-63歲），入組時(shí)骨髓的腫瘤負(fù)荷中位值為17.0%（2.0-72.7%）。 1例患者同時(shí)有髓外病變（EMD）。入組前，患者曾經(jīng)接受的治療中位線數(shù)為8（3-17）。 而且，7例患者有造血干細(xì)胞移植史，從上次移植到復(fù)發(fā)的中位間隔期為12.5個(gè)月（3.5-19.5個(gè)月）。

在dVHH NS7CAR-T細(xì)胞輸注后28天評(píng)估，7/10（70%）患者在骨髓中實(shí)現(xiàn)了完全緩解（CR），其中6人達(dá)到了微小殘留病灶（MRD）陰性CR。 3例患者無(wú)效（NR），其中1例EMD患者根據(jù)第35天的PET-CT評(píng)估達(dá)到部分緩解（PR）。 所有NR患者發(fā)現(xiàn)CD7抗原丟失。 中位隨訪時(shí)間為為178天（28-776天）。 對(duì)于7例CR患者，3例在CD7 CAR-T細(xì)胞輸注約2個(gè)月后接受了鞏固性第二次異基因造血干細(xì)胞移植。一例患者在隨訪401天仍處于緩解狀態(tài)，而其他2例患者分別于241天和776天死于移植相關(guān)死亡和感染。對(duì)于其他4例沒(méi)有橋接移植的患者，3例分別于第47天、第83天和第89天復(fù)發(fā)（3例患者復(fù)發(fā)時(shí)CD7均丟失），另外1例患者死于肺部感染。

關(guān)于安全性，大多數(shù)患者（80%）出現(xiàn)輕度細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS），7例患者呈I級(jí)，1例呈II級(jí)CRS，而2例患者（20%）呈III級(jí)CRS。 沒(méi)有神經(jīng)毒性的發(fā)生。 在7例有移植史的患者中，1例（為在之前移植后約100天后復(fù)發(fā)的患者）在CAR-T治療后出現(xiàn)輕度皮膚移植物抗宿主疾病。

結(jié)論

我們的研究說(shuō)明dVHH NS7CAR-T療法可以使難治復(fù)發(fā)的AML患者再次達(dá)到初步的完全緩解，即使是對(duì)于之前接受過(guò)多線治療以及移植后復(fù)發(fā)的AML患者。NS7CAR-T治療的安全性是可控的。在dVHH NS7CAR-T療法后，鞏固性異基因造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）在我們的試驗(yàn)中仍然在維持長(zhǎng)期療效方面發(fā)揮作用。然而，CD7抗原丟失是不緩解或復(fù)發(fā)患者的一個(gè)主要問(wèn)題,我們發(fā)現(xiàn)5/6例伴有double CEBPA 突變的AML患者在后續(xù)丟失了CD7抗原，顯示出較差的預(yù)后，這提示在以后CD7CAR-T治療AML的臨床試驗(yàn)中可能要考慮是否排除這類患者。最后，為了更好評(píng)估納米抗體基礎(chǔ)的NS7CAR-T在治療CD7陽(yáng)性AML方面的療效和安全性，需要納入更多的患者和隨訪更長(zhǎng)時(shí)間來(lái)進(jìn)一步證實(shí)。

3.陸道培醫(yī)院在新型CD19 STAR-T治療B-ALL上的研究成果

2022年5月1日，陸道培醫(yī)院陸佩華教授團(tuán)隊(duì)和清華大學(xué)醫(yī)學(xué)院林欣教授團(tuán)隊(duì)合作在美國(guó)著名血液學(xué)雜志《American Journal of Hematology》 (IF=13.265)發(fā)表新型CD19靶向STAR-T細(xì)胞治療R/R B-ALL的研究論文，該項(xiàng)研究的臨床前研究以及臨床研究用STAR-T和STAR-OX40-T細(xì)胞均由清華大學(xué)（醫(yī)學(xué)院）和華夏英泰生物科技公司研發(fā)和制備。首次人體I期臨床研究在陸道培醫(yī)院進(jìn)行。

CAR-T細(xì)胞療法在B細(xì)胞惡性腫瘤患者中已顯示出高應(yīng)答率，但緩解持續(xù)時(shí)間和安全性仍待提高。研究者開發(fā)了一種新型的雙鏈嵌合受體——STAR，由2個(gè)蛋白質(zhì)模塊組成，每個(gè)模塊均包含抗體輕鏈或重鏈可變區(qū)，融合的T細(xì)胞受體（TCR）a 和 b鏈恒定區(qū)與OX40共刺激域結(jié)合，通過(guò)自裂解弗林蛋白酶-p2A序列連接的2個(gè)模塊，允許模塊通過(guò)蛋白水解分離和重組。本文報(bào)告了STAR-T細(xì)胞療法的臨床前研究和CD19 STAR-OX40-T細(xì)胞治療難治/復(fù)發(fā)（R/R）急性B細(xì)胞淋巴細(xì)胞白血病（B-ALL）的I期臨床研究結(jié)果（https://clinicaltrials.gov, NCT03953599）。

從健康供體和患者分別獲得外周血（PB）單核細(xì)胞，用于臨床前和臨床研究；應(yīng)用慢病毒載體把STAR結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)導(dǎo)至T細(xì)胞獲得STAR-T細(xì)胞，并利用白血病異種移植小鼠模型評(píng)估STAR-T細(xì)胞抗腫瘤功能。從2019年12月至2020年6月，該試驗(yàn)共入組18例CD19 + R / R B-ALL患者（男女比例為10：8），中位年齡為22.5歲。在輸注STAR-OX40-T細(xì)胞前，患者接受3日的靜脈注射氟達(dá)拉濱（25mg/m2·d）和環(huán)磷酰胺（250mg/m2·d）的預(yù)處理治療。在患者達(dá)到完全緩解（CR）后，可以選擇是否繼續(xù)進(jìn)行鞏固性的異體造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）。

在臨床前細(xì)胞水平研究中發(fā)現(xiàn)CD19 STAR-T細(xì)胞在靶細(xì)胞的刺激下，其展示出更快的活化時(shí)間，更高的細(xì)胞因子分泌量以及更好的腫瘤殺傷效果，顯著優(yōu)于常規(guī)CAR-T細(xì)胞（BBz-CAR），在白血病異種移植小鼠模型中，在不同劑量的T細(xì)胞治療下， STAR-T細(xì)胞比BBz-CAR-T細(xì)胞展示出更強(qiáng)的腫瘤清除，并無(wú)顯著的組織損傷情況；隨后，進(jìn)一步偶聯(lián)不同共刺激分子至STAR結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)化以增強(qiáng)STAR-T細(xì)胞的增殖能力，細(xì)胞水平結(jié)果顯示STAR偶聯(lián)OX40 (STAR-OX40)后，在靶細(xì)胞的刺激下能顯著增加IL-2的分泌以及增殖水平，該結(jié)構(gòu)顯著優(yōu)于其他結(jié)構(gòu) (如：STAR-4-1BB, STAR-CD28, STAR-CD27, STAR-ICOS), 此外，其在靶細(xì)胞與外周血細(xì)胞共培養(yǎng)體系下，分泌出更低的細(xì)胞因子風(fēng)暴（CRS）相關(guān)的細(xì)胞因子。不同的白血病異種移植小鼠模型結(jié)果同樣顯示STAR-OX40-T細(xì)胞具有更好的腫瘤清除效果和增殖效果，并且能夠有效的抑制腫瘤的復(fù)發(fā)效果。根據(jù)細(xì)胞水平和動(dòng)物水平的研究，STAR-OX40結(jié)構(gòu)用于I期臨床研究。

該I期臨床試驗(yàn)中，中位隨訪時(shí)間為507天(范圍：63-665天)。治療前中位骨髓原始細(xì)胞水平為15.3% (范圍0.5% - 90.5%)，1例為移植后復(fù)發(fā)患者，2例有中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病(CNSL)。18例患者均接受中位劑量為1×106 / kg的STAR-OX40-T細(xì)胞的單次輸注：低劑量組（5×105 / kg，n = 3），中劑量組（1×106 / kg，n = 8）和高劑量組（2~2.5×106 / kg，n = 7）。從采集到輸注STAR-OX40-T細(xì)胞的中位時(shí)間為9天（7-13天）。中位轉(zhuǎn)染效率為57.4％。STAR-OX40-T細(xì)胞輸注后兩周評(píng)估，100％（n=18）的患者獲得完全緩解（CR）且微小殘留病（MRD）陰性， 在30天后評(píng)估，CR率為100%，有1例患者出現(xiàn)了原始細(xì)胞0.09%的MRD陽(yáng)性。在 STAR-OX40-T 細(xì)胞回輸后中位 57.5 天（范圍：40-67 天），16/18 (88.9%) 的CR患者（15 例 MRD 陰性，1 例MRD 陽(yáng)性）選擇接受了鞏固性的 allo-HSCT。在中位隨訪 549 天（范圍：433- 665 天）后，11例患者仍保持 MRD 陰性 CR，1例在第 477 天變?yōu)?MRD 陽(yáng)性，其他三例分別在第 211 天、第 305 天和第 345 天出現(xiàn)復(fù)發(fā)，1例在第 210 天死亡。在 allo-HSCT 后，7 例患者出現(xiàn)急性 GVHD（4 例I 級(jí)、1 例II 級(jí)、1 例 III 級(jí)和 1 例 IV 級(jí)），3 例患者出現(xiàn)局限于皮膚或肺部的輕度慢性 GVHD。在未接受 鞏固allo-HSCT 的兩例患者中，一例在第 58 天復(fù)發(fā)并在第 63 天死亡。該患者的治療前 BM 原始細(xì)胞水平比例為 90%，BCR-ABL1 (P210) 陽(yáng)性且患有CNSL。另一例在第 186 天復(fù)發(fā)，并在第 378 天死于復(fù)發(fā)。整體來(lái)看，總共有6例患者在接受 STAR-OX40-T 細(xì)胞治療后復(fù)發(fā)。出現(xiàn)復(fù)發(fā)時(shí)，4 例患者為 CD19+，2 例患者為 CD19-。

關(guān)于不良反應(yīng)方面，只有55.6%（n=10）的患者出現(xiàn)了1-2級(jí)輕度的細(xì)胞因子釋放綜合征CRS，其中8例患者為1級(jí)CRS，2例為2級(jí)CRS。另外，2例患者出現(xiàn)3級(jí)神經(jīng)毒性反應(yīng)。

臨床前研究證明了STAR-T細(xì)胞在臨床前研究及動(dòng)物模型中在T細(xì)胞活化能力、細(xì)胞因子產(chǎn)生能力和抗腫瘤療效方面比常規(guī)CAR-T細(xì)胞優(yōu)越。首次用在人身上的I期臨床研究證明了STAR-OX40-T在治療CD19 + R / R B-ALL中的技術(shù)可行性、臨床安全性和有效性。輸注后可達(dá)到較高的CR率，且毒性較低。但仍需對(duì)這些患者進(jìn)行長(zhǎng)期觀察，并進(jìn)行更大范圍的患者研究。

4.陸道培醫(yī)院在一天內(nèi)即可快速制備的FasT CAR-T治療B-ALL的研究結(jié)果

2022年7月，陸道培醫(yī)院和亙喜公司合作在血液學(xué)著名期刊《Blood Cancer Journal》（IF=9.812）發(fā)表《Next-Day Manufacture of a Novel Anti-CD19 CAR-T Therapy for B-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia: First-in-Human Clinical Study》的文章。

于2019年與亙喜生物技術(shù)有限公司合作啟動(dòng)了最新的FasT CAR-T療法治療難治/復(fù)發(fā)B-ALL，使其制備時(shí)間縮短至次日即可。目前傳統(tǒng)CD19 CAR-T制備主要存在的問(wèn)題：周期長(zhǎng)，需要 7–14天的生產(chǎn)時(shí)間；成本高；T細(xì)胞衰竭的問(wèn)題等。為了改善臨床結(jié)果并縮短CAR-T細(xì)胞的制備時(shí)間，開發(fā)了 FasT CAR-T (F-CAR-T) 制造平臺(tái)。新模式下的FasT CAR-T 可在次日內(nèi)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增，大大縮短了制備時(shí)間，而且FasT CAR-T細(xì)胞有以下特點(diǎn)：更強(qiáng)的擴(kuò)增能力，更年輕的細(xì)胞表型，細(xì)胞衰竭更少，更強(qiáng)的腫瘤殺傷效應(yīng)。通過(guò)臨床前和首次人體臨床研究，評(píng)估了 CD19 F-CAR-T 在 B 細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病 (B-ALL) 中的安全性、可行性和初步臨床療效。在臨床前研究中，與傳統(tǒng)的 CAR-T 細(xì)胞相比，CD19 F-CAR-T 細(xì)胞表現(xiàn)出優(yōu)異的增殖能力，具有更年輕的細(xì)胞表型、更少的耗竭和更有效的腫瘤消除。在我院進(jìn)行的 I 期臨床研究 (NCT03825718) 中，共入組了25 例難治/復(fù)發(fā)B-ALL患者，其中5例為14歲以下兒童。F-CAR-T 細(xì)胞100%制備成功，25例患者均接受了輸注。 I期臨床研究結(jié)果顯示：CD19 F-CAR-T 的安全性是可控的，24 例 (96%) 患者發(fā)生了 CRS，其中 18 例 (72%) 為 1-2 級(jí) CRS，6 例 (24%) 為 3 級(jí)，未出現(xiàn) 4 級(jí)或更高級(jí)別的 CRS。 在 >14 歲組中，16/20 (80%) 的患者出現(xiàn)輕度 CRS，只有 2/20 (10%) 的患者出現(xiàn) 3 級(jí) CRS。 對(duì)于≤14 歲的患者組，2/5 (40%) 出現(xiàn)輕度 CRS，但 3/5 (60%) 出現(xiàn)3 級(jí) CRS。 在 7 (28%) 例患者中觀察到 ICANS，其中 2 (8%) 例 3 級(jí) ICANS 發(fā)生在 > 14 歲的患者中，5 (20%)例 4 級(jí) ICANS 均發(fā)生在 14 歲以下的患者中。

在F-CAR-T輸注后14天評(píng)估，23/25 名患者達(dá)到了微小殘留病（MRD）陰性的完全緩解（CR），隨后 20 例患者在 F-CAR-T 治療后 3 個(gè)月內(nèi)橋接了異基因造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）。 20 例患者中有 15 例仍處于無(wú)病生存狀態(tài)，中位緩解持續(xù)時(shí)間為 734 天。其中一例患者復(fù)發(fā)，4/20 死于移植相關(guān)死亡。在未接受 allo-HSCT 的 3 例患者中，有 2 例患者在 F-CAR-T 后 隨訪10 個(gè)月仍處于 CR 狀態(tài)。研究表明：穩(wěn)健、快速的 F-CAR-T 細(xì)胞生產(chǎn)工藝是可行的，并且可以在一天產(chǎn)生足夠數(shù)量的細(xì)胞，與傳統(tǒng)CAR-T 細(xì)胞相比，具有更出色的擴(kuò)增能力、更豐富的 Tscm/Tsm 亞群和更少的衰竭細(xì)胞。 我們的首次人體臨床研究進(jìn)一步表明，F(xiàn)-CAR-T治療難治/復(fù)發(fā) B-ALL 青少年和成人患者是安全、可靠和療效好的。我們的 FasT CAR-T 制造平臺(tái)可以代表一種更具成本效益的CAR-T 細(xì)胞免疫方法，可以顯著減少制備時(shí)間和成本，甚至減少患者的臨床住院時(shí)間。

5.陸道培醫(yī)院在CAR-T細(xì)胞治療復(fù)發(fā)/難治多發(fā)性骨髓瘤和淋巴瘤臨床試驗(yàn)獲得肯定性結(jié)果

我院在CAR-T細(xì)胞治療B-ALL上獲得了優(yōu)異的療效，且積累了大量的經(jīng)驗(yàn)，近年來(lái)也積極開展了CAR-T細(xì)胞治療血液系統(tǒng)其他腫瘤的研究，一是CAR-T細(xì)胞治療復(fù)發(fā)或難治BCMA陽(yáng)性多發(fā)性骨髓瘤患者的安全性和有效性臨床研究；另一個(gè)是CAR-T細(xì)胞治療難治復(fù)發(fā)淋巴瘤患者的安全性和有效性臨床研究，與國(guó)內(nèi)外報(bào)導(dǎo)的研究結(jié)果可相媲美。關(guān)于我院和西比曼公司合作的BCMA CAR-T （C-CAR088）治療多發(fā)性骨髓瘤的研究，最佳總體緩解（BOR）包括6例完全緩解（CR）、10例非常好的部分緩解（VGPRs）、4例部分緩解（PR）。C-CAR088治療R / R MM患者的臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示良好的安全性和有效性。此項(xiàng)優(yōu)異的研究結(jié)果入選為2020年第62屆美國(guó)ASH大會(huì)口頭報(bào)告。另外，關(guān)于我院在CAR-T治療B細(xì)胞淋巴瘤的研究，近期我院在多例難治/復(fù)發(fā)淋巴瘤患者其中包括異體移植后復(fù)發(fā)以及CD19治療失敗的淋巴瘤患者，通過(guò)CD19/CD22 CAR-T治療取得了完全緩解，且安全性良好，該研究結(jié)果被入選于2022年6月歐洲血液學(xué)年會(huì)（EHA）口頭報(bào)告。

6.陸道培醫(yī)院在異基因造血干細(xì)胞移植復(fù)發(fā)后行CAR-T細(xì)胞治療的臨床結(jié)果

從2016年2月到2018年10月，我院共入組了32例異基因造血干細(xì)胞移植復(fù)發(fā)的患者，在無(wú)活動(dòng)性GVHD情況下，接受CAR-T細(xì)胞治療，發(fā)現(xiàn)第30天的完全緩解率仍可高達(dá)87.5% （28/32）， 只有3例出現(xiàn)了III-IV的CRS。而且，隨訪一年的整體生存率（OS）為68.8%，說(shuō)明CAR-T細(xì)胞治療依然給予了一些移植后復(fù)發(fā)的患者二次希望。我院的該項(xiàng)研究結(jié)果與北京大學(xué)血液病研究所合作于2020年8月發(fā)表于國(guó)際期刊 《Cytotherapy》（IF=6.196）。

7.陸道培醫(yī)院在人源性CD19 CAR-T細(xì)胞治療B-ALL的成功研究結(jié)果

我院在CAR-T細(xì)胞治療血液腫瘤中積累了大量的經(jīng)驗(yàn)，面對(duì)目前鼠源化CD19 CAR-T治療后CD19陽(yáng)性復(fù)發(fā)的問(wèn)題，我們和宣武醫(yī)院合作開展了人源性CAR-T治療難治/復(fù)發(fā)B-ALL患者的療效和安全性研究，發(fā)現(xiàn)對(duì)于使用鼠源化的CAR-T細(xì)胞治療失敗或者復(fù)發(fā)后，仍然能從人源性CAR-T治療中獲益，我們合作的初步研究結(jié)果論文于2019年9月發(fā)表在國(guó)際知名期刊《Clinical Cancer Research》（IF=13.801，陸佩華院長(zhǎng)為共同通訊作者），其更進(jìn)一步的長(zhǎng)期隨訪鼠源化治療失敗使用人源化CAR-T的研究于2022年6月發(fā)表在SCI雜志《Frontiers in oncology》（IF=5.738，陸佩華院長(zhǎng)為共同通訊作者）。

8.陸道培醫(yī)院在新工藝新技術(shù)CAR-T細(xì)胞治療的研究成果

我院在2021年啟動(dòng)了CD7 通用型CAR-T治療難治/復(fù)發(fā)T細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病（T-ALL）或者T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤（T-LBL）的研究，目前已經(jīng)取得了階段性進(jìn)展，這其中包括異基因移植后復(fù)發(fā)的T-ALL或T-LBL, 均顯示了較高的完全緩解率和安全性，通用型CAR-T不依賴患者本身制備，這將對(duì)本身無(wú)法滿足制備CAR-T條件的患者帶來(lái)新的治療選擇。另外，在CAR-NKG2D治療AML，以及CD7CAR-T治療CD7陽(yáng)性的AML上也已經(jīng)使得多例患者受益，對(duì)于難治復(fù)發(fā)AML患者，我們?nèi)栽谂﹂_展新的臨床試驗(yàn)，使更多髓系白血病患者能從中受益。

綜上所述，我院臨床經(jīng)驗(yàn)豐富的治療團(tuán)隊(duì)與CAR-T的研發(fā)團(tuán)隊(duì)的強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合，再次為這些原本無(wú)望的病人贏得了生機(jī)。臨床結(jié)果顯示，CAR-T治療難治/復(fù)發(fā)B-ALL，T-ALL, 骨髓瘤和淋巴瘤等療效確切，且安全性良好。同時(shí)，我們依然在不斷探索新的方法，以科研為基礎(chǔ)，竭盡全力為患者帶去福音。